本文目录一览:
- 1、配细胞培养基应该用什么试剂来调节PH值
- 2、配培养基时是不是只要用一般的化学试剂就可
- 3、细胞培养的培养基
- 4、为什么有些培养基叫培养基基础,多了基础两个字?
- 5、请问如何进行试剂及培养基的管理?
- 6、酵母菌的培养基用什么调节ph值及相关试剂的配制
配细胞培养基应该用什么试剂来调节PH值
大黄鱼EPC细胞的培养基PH值多少为宜 大多数培养基的成分是由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等五类物质组成。配制植物培养基以利用强碱弱酸盐和强酸弱碱盐的水解来调节,人体的PH缓冲物质也是利用这原理。
配培养基时是不是只要用一般的化学试剂就可
是的,但是看是培养什么东西做什么用。对于严格的细胞培养就必须用生化试剂,但是培养普通细菌(适应性好的,对重金属不敏感)就可以使用普通试剂。一般我建议(个人观点)对于一般培养使用分析纯。用于种用的用优级纯,或生化试剂。医用,人体用,用医疗或是生化试剂。
培养可以口服的用生化试剂或是优级纯试剂。但是大规模种植菌种就可以用化学纯,工业纯。
细胞培养的培养基
几种常用细胞培养基产品
⒈ BME(basal medium eagle)基础伊格培养基
⒉ MEM
⒊ DMEM
⒋ IMDM
⒌ RPMI-1640
⒍ M199
⒎ Mccoy's 5A
⒏ F10\ F12 \DMEM混合F12(三)几种常用细胞培养配套试剂的配置(缓冲液、平衡盐溶液等)
1、无钙、镁、离子溶液(1000ml)
氯化钠(NaCl)8g磷酸二氢钠、(NaH2PO4H20)0.05g、氯化钾(KCl)0.2g、碳酸氢钠(NaHCO3)1g、柠檬酸三钠(Na3C6H5O7,H20)1g、葡萄糖1g、加去离子水或双蒸水至1000mL
2、PBS(Phosphate-Buffered saline)磷酸盐缓冲液
甲液:0.2mol/L磷酸氢二钠溶液、磷酸氢二钠(无水)28.4g、氯化钠8.77g加去离子水或双蒸水至1000mL
乙液:0.2mol/L磷酸二氢钠溶液、磷酸二氢钠(无水)2.4g、氯化钠8.77g加去离子水或双蒸水至1000mL
甲、乙液于4℃保存,使用时按表3-2所示比例,配制成所需pH浓度,高压灭菌后室温保存。
3、Hanks液(HBSSHank‘s Balanced salt solution)
⑴母液甲(20x)配法
①NaCl(A.R)160g、KCl(A.R)8g、MgSO4.7H2O(A.R)2g、MgCl.6H2O(A.R)2g依次溶于800mL双蒸水中,前一物质溶后再加后一种。
②CaCl2(A.R)2.8g溶于100mL双蒸水中,溶时不断搅拌(此液应单配,单溶)。
待上述两溶液中的“溶质”全溶后,将它们混合,再用双蒸水补至1000mL,向其中加2mL氯仿作为防腐剂,置4℃保存。
⑵母液乙(20×)配法
①Na2HPO4.12H2O(A.R)3.04g、KH2PO4(A.R)1.20g、葡萄糖(A.R)20.0g溶于800ml双蒸水中。
②0.4%酚红液0.4g酚红放在玻璃研钵后加0.01N、NaOH11.28mL,直到全部溶解,移入100mL容量瓶中,加水至100mL,过滤,pH为7.4,4℃保存。
待上述各“溶质”完全溶解后,用双蒸水补至1000mL,其中加氯仿2mL作防腐剂,置40℃保存。
3)使用液(1×)配法
取母液甲和母液乙各一份,加双蒸水18份,分装后,塞好瓶塞,挂上标志。以115℃高压灭菌25分钟(以免葡萄糖破坏),置室温后4℃保存,可使用几个月。临用前,用7.5%NaHCO3调至所需pH。
4、Eagle's液(EBSSEagle's Balanced salt solution)
是一种在二氧化碳(CO2)环境中短期维持细胞活性的平衡盐溶液,可用于细胞解离前的清洗、细胞或组织的运输、细胞计数时稀释、溶液的配置等。
5、HEPES液
生物缓冲液,化学性质稳定,在PH7.2~7.6范围内,比NaHCO3缓冲液的缓冲能力更强。
6、NaHCO3缓冲液
常规缓冲体系的一部分,但是不稳定,易受空气中CO2的含量而改变PH值,影响缓冲效果。
为什么有些培养基叫培养基基础,多了基础两个字?
某某培养基基础也是培养基,只是这是基础培养基,一般这种培养基都需要添加培养基的配套试剂,因为有些配套试剂的成分如果在加在干粉培养基里边会容易因灭菌或者是干粉状态的原因而失效,所以为了保证实验效果这些配套试剂一般都是后面添加进去的。比如,庖肉培养基基础,这个是要加庖肉牛肉粒一起才能完成实验的。又如,四硫磺酸钠煌绿增菌液基础,这个要添加煌绿和碘液才能完成实验。
请问如何进行试剂及培养基的管理?
传统试剂和培养基的管理方式为纸质记录,包括人员登记,使用记录等等,存储条件和环境、空间也是制定书面规程后进行。我们实验室之前也是这么管的,但是非常耗费人力和时间。现在借助的实验室信息化管理系统ilabpower CIMS,每个试剂都有自己的二维码,手机扫着用扫着还很方便,也不会乱,然后每个仓库都分冰箱、普通柜子,还有专门的危化品柜子之类的,也挺安全的,每个柜子也有不同的位置,位置上条码可以扫了存放。感觉纯靠人管会比较麻烦。这系统的操作蛮简单,不用花费很多时间,每天都有数据记录也有统计报表,不只是有每个人拿试剂、耗材、仪器之类的记录,也会有用完试剂归还、报废的记录,还可以查不同仓库的库存信息。
酵母菌的培养基用什么调节ph值及相关试剂的配制
酵母菌是一类真菌,最通用的培养基是马铃薯蔗糖琼脂培养基,其配方为:马铃薯
20g(去皮后,煮汁)蔗糖
2g自来水
100ml琼脂
2gph
自然(约6.0)灭菌
1.05kg/cm2,20min
其ph值不用调整,因为配出来后它大约为6.0左右,符合酵母菌的生长ph范围